Project: POCI-01-0145-FEDER-029589

Project name:	FilmProt - The use of Escherichia coli biofilms for the production of recombinant proteins and other added-value compounds
Project code:	POCI-01-0145-FEDER-029589
Main Objective:	Reforçar a investigação, o desenvolvimento tecnológico e a inovação
Intervention Region:	Norte, Lisboa
Proposing institution/Lead promoter/Coordinating entity:	Faculdade de Engenharia da Universidade do Porto
Partner(s)/Co-promoter(s)/Participating institution(s):	Associação do Instituto Superior Técnico para a Investigação e o Desenvolvimento
Date of approval:	2018-07-18
Start date:	2018-10-01
Completion date:	2022-05-31

Eligible Cost of the Project

Total Eligible Cost:	239.820,97 EUR
Eligible Cost in the University of Porto:	204.820,97 EUR
Faculdade de Engenharia da Universidade do Porto:	204.820,97 EUR

Total Financial Support

União Europeia - FEDER:	174.097,82 EUR
Orçamento de Estado:	65.723,15 EUR

Financial Support to the University of Porto

Total of the University of Porto:	204.820,97 EUR
União Europeia \| União Europeia - FEDER \| Faculdade de Engenharia da Universidade do Porto:	174.097,82 EUR
Nacional/Regional \| Orçamento de Estado \| Faculdade de Engenharia da Universidade do Porto:	30.723,15 EUR

Objectives, activities and expected/achieved results

Objetivos e Atividades
O projeto tem dois objetivos principais, o primeiro é otimizar as condições da cultura para determinar as produções máximas específicas e volumétricas que podem ser obtidas com o sistema de biofilme e o segundo é investigar a robustez do sistema estudando sua capacidade de expressar proteínas de tamanhos diferentes e para expressar simultaneamente 3 enzimas que compreendem uma via artificial de 4 etapas para a síntese de um composto de valor acrescentado.
O projeto contempla as seguintes atividades:
Atividade 1 - Seleção de superfícies
Atividade 2 - Construção de vetores
Atividade 3 - Otimização do meio para produção de GFP
Atividade 4 - Expressão de proteínas de fusão com GFP
Atividade 5 - Otimização de condições hidrodinâmicas para produção de GFP
Atividade 6 - Otimização da produção de curcumina
Atividade 7 - Otimização da produção de GFP

Resultados Esperados/Atingidos
Relativamente à atividade 1, provou-se que o PVC é a superfície mais adequada
Na atividade 2, foram conseguidas as construções planeadas.
na atividade 3 concluiu-se que o meio TB permite produções mais elevadas.
Na actividade 4 descobriu-se que a produção de proteína obtida pelo construto pET28a_At4Cl_DCS_CURS_GFP foi significativamente mais baixo do que quando os genes individuais são expressos com a GFP
Na atividade 5 prvou-se que maiores caudais de recirculação promovem a produção de GFP em biofilmes
Relativamente à atividade 6, descobriu-se que um abaixamento na temperatura de cultivo é benéfica para a produção de curcumina.
Na atividade 7 descobriu-se que menores quantidades de IPTG parecem ser mais indicadas para potenciar a produção de proteina recombinante neste sistema

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