Objetivos e Atividades
Dando o elevado potencial das técnicas de FISH recém-desenvolvidas e as propriedades de hibridização dos novos mímicos, neste projeto propomos combinar várias estratégias para desenvolver uma nova metodologia FISH codificada por cores, que vai permitir uma deteção rápida, robusta e em multiplex (deteção de vários alvos simultaneamente) de genes de resistência de cópia única. Como caso de estudo serão selecionadas duas espécies resistentes, muito comuns e problemáticas - Enterobacteriaceae resistentes a carbapenem e Staphylococcus aureus resistente à meticilina.
Resultados Esperados/Atingidos
Como as propriedades dos agentes patogénicos são muito diversas, a primeira tarefa destina-se a prever as propriedades de hibridação para os diferentes mímicos, a fim de estabelecer as moléculas mais adequadas a cada situação. Uma vez alcançado este objetivo, será feito o desenho das moléculas para os agentes e resistências selecionadas. Em seguida, o método FISH será otimizado para a deteção de fenótipos de resistência e, nesta fase, a marcação combinatória das sondas será usada para aumentar o número de genes/agentes distinguíveis. Finalmente, a eficiência do método desenvolvido será testada em amostras de ambiente clínico e comparada com a aplicação de técnicas de cultura convencionais. |